上一篇文章《生化實驗室有哪些建設(shè)要求(生化實驗室建設(shè)方案)》,我們講到了一般分子生物學(xué)實驗室常分為生化實驗室與分子實驗室,分子生物學(xué)是從研究生物大分子的結(jié)構(gòu)發(fā)展起來的,現(xiàn)在更多的仍是研究生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系、以及調(diào)控等方面的機(jī)制問題,以生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)等學(xué)科的知識為基礎(chǔ)。同時也說到了生化實驗室的建設(shè)方案,那接下來今天就要說說分子生物實驗室建設(shè)方案。
分子生物實驗室建設(shè)方案
分子生物研究和實驗的常規(guī)方法,并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為了避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排式氣流組織形式。同時控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū):主要是作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備,試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料需貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。
標(biāo)本制備區(qū):作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時DNA的合成。其壓力梯度要求為相對于臨近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)域內(nèi)不必要的走動。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū):主要是DNA擴(kuò)增,已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液,制備成反應(yīng)混合液等,也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測定中,通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。因此擴(kuò)增有較高的污染危險性,因此本區(qū)的壓力梯度要求為,相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)域漏出。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定,如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區(qū)域可不設(shè)。應(yīng)注意擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為,相對于臨近區(qū)域為負(fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)域擴(kuò)散至其它區(qū)域。
實驗室配套設(shè)施:是保證實驗工作的必要條件,根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、生物柜、離心機(jī)、加樣器等。
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